Description
Die beste 2-CMC-Kristalle Forschungschemikalie online
Die Hepatitis-E-Virusinfektion (HEV) hat sich zu einem globalen Gesundheitsproblem entwickelt, doch es gibt derzeit kein zugelassenes Medikament. Die beste 2-CMC-Kristalle Forschungschemikalie online. Das Nukleosidanalogon 2′-C-Methylcytidin (2CMC), ein viraler Polymeraseinhibitor, hemmt nachweislich die Infektion mit verschiedenen Viren, darunter auch dem Hepatitis-C-Virus (HCV). Wir berichten hier, dass 2-CMC die Replikation von HEV in einem subgenomischen Replikationsmodell und in einem System mit einem vollständigen infektiösen Virus signifikant hemmt. Wichtig ist, dass eine Langzeitbehandlung mit 2CMC nicht zu einem Verlust der antiviralen Wirksamkeit führte, was auf eine hohe Resistenzbarriere hindeutet. Die Kombination von 2CMC mit Ribavirin, einem für HEV nicht zugelassenen Medikament, zeigte jedoch antagonistische Effekte. Unsere Ergebnisse legen nahe, dass 2CMC ein potenzielles antivirales Medikament gegen HEV-Infektionen darstellt.
Einführung
Das Hepatitis-E-Virus (HEV) ist ein einzelsträngiges, positiv-strängiges RNA-Virus, dessen Genom drei offene Leserahmen (ORFs) enthält. ORF1 kodiert für ein Polyprotein, das als Vorstufe aller für die HEV-Replikation benötigten nichtstrukturellen Proteine dient. ORF2 kodiert für das Kapsidprotein des HEV-Virions. ORF3 kodiert für ein kleines, multifunktionelles Protein mit einer Molekülmasse von 13 kDa [ 11 ]. Ursprünglich ging man davon aus, dass HEV akute Infektionen nur in Entwicklungsländern verursacht. In den letzten zehn Jahren wurden jedoch vermehrt Fälle von Hepatitis E auch in Industrieländern gemeldet, die hauptsächlich als autochthone Fälle und nicht als importierte Erkrankung eingestuft werden [ 11 , 12 ]. Im Allgemeinen verläuft eine HEV-Infektion selbstlimitierend und asymptomatisch, weshalb die Mortalitätsrate niedrig ist. Bei Schwangeren kann sie jedoch zu einer hohen Mortalität führen. Bei immungeschwächten Patienten nach einer Organtransplantation entwickeln über 60 % der HEV-infizierten Patienten eine chronische Erkrankung mit rasch fortschreitender schwerer Leberkomplikation wie Fibrose und Zirrhose [ 20 ]. Neben der Hepatitis wird dieses Virus mit einer Vielzahl extrahepatischer Manifestationen, insbesondere Nieren- und neurologischen Schäden, in Verbindung gebracht [ 14 , 21 ]. Daher ist die Entwicklung spezifischer antiviraler Medikamente gegen HEV-Infektionen dringend erforderlich.
Nukleosidanaloga werden seit fast 50 Jahren klinisch eingesetzt und bilden die Grundlage der Behandlung von Patienten mit Krebs oder Virusinfektionen. Ribavirin (RBV) wurde als Off-Label-Antivirenmittel verwendet und zeigte bei vielen Patienten mit chronischer HEV-Infektion eine hohe Wirksamkeit. Allerdings wurden HEV-Mutationen im Zusammenhang mit Therapieversagen unter Ribavirin beschrieben [ 4 , 7 ]. Sofosbuvir (SOF), ein potenter direkt wirkender Wirkstoff (DAA) gegen das Hepatitis-C-Virus (HCV) [ 2 ], hemmt laut neueren Studien die HEV-Replikation in Zellkulturen und zeigt in Kombination mit Ribavirin einen additiven Effekt [ 4 ]. Andere In-vitro- und klinische Studien haben jedoch gezeigt, dass Sofosbuvir gegen HEV-Infektionen nicht sehr wirksam ist [ 8 , 18 , 19 ]. Daher ist dieses Medikament möglicherweise kein vielversprechender Kandidat für die Behandlung von Patienten mit chronischer HEV-Infektion.Die beste 2-CMC-Kristalle Forschungschemikalie online
2′-C-Methylcytidin (2CMC) wurde ursprünglich als kompetitiver Inhibitor der HCV-RNA-abhängigen RNA-Polymerase (RdRp) identifiziert. Neben HCV hemmt es nachweislich auch die Replikation verschiedener anderer Viren ( z. B. Dengue-Virus und Norovirus) [ 13 , 15 ]. Es wurde außerdem berichtet, dass es das Cutthroat-Forellenvirus, ein nicht-pathogenes Fischvirus mit bemerkenswerter Ähnlichkeit zu HEV, hemmt [ 6 ]. In dieser Studie konnten wir zeigen, dass 2CMC die HEV-Replikation effizient hemmt und somit ein potenzieller Kandidat für die Entwicklung von Anti-HEV-Medikamenten ist.Die beste 2-CMC-Kristalle Forschungschemikalie online
Materialen und Methoden
Reagenzien und Antikörper
2CMC, RBV, Guanosintriphosphat (GTP) und Cytidin-5′-triphosphat (CTP) wurden von Sigma-Aldrich bezogen und in Dimethylsulfoxid (DMSO) (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) gelöst. Der HEV-spezifische Antikörper wurde von EMD Millipore (MAB8002) erworben.
HEV-Zellkulturmodelle
In dieser Studie wurden verschiedene Zelllinien verwendet, darunter humane Hepatomzelllinien (Huh7 und PLC/PRF/5), eine humane embryonale Nierenzelllinie (HEK293), eine humane primäre Glioblastomzelllinie (U87) und eine humane fetale Lungenfibroblastenzelllinie (MRC5). Die Huh7- und U87-Zellen wurden freundlicherweise von Professor Bart Haagmans vom Department für Virologie des Erasmus Medical Center zur Verfügung gestellt. Die humane embryonale Nierenzelllinie HEK293 sowie PLC/PRF/5 und MRC5 wurden ursprünglich von der ATCC ( http://www.atcc.org ) bezogen. Diese Zellen wurden in Dulbeccos modifiziertem Eagle-Medium (Lonza Biowhittaker, Verviers, Belgien) kultiviert, dem 10 % fötales Kälberserum, 100 IE Penicillin pro ml und 100 μg Streptomycin pro ml zugesetzt waren.
Für das vollständige HEV-Modell wurde ein Plasmidkonstrukt mit dem vollständigen HEV-Genom (Kernow-C1 p6-Klon; GenBank-Zugangsnummer JQ679013 ) verwendet, um HEV-Genom-RNA mithilfe des Ambion mMessage mMachine in vitro RNA-Transkriptionskits (Thermo Fisher Scientific Life Sciences) zu generieren [ 16 ]. Huh7-, PLC/PRF/5-, HEK293-, U87- und MRC5-Zellen wurden mit vollständiger HEV-Genom-RNA elektroporiert, um aufeinanderfolgende HEV-infizierte Zellmodelle (Huh7-p6, PLC/PRF/5-p6, HEK293-p6, U87-p6 und MRC5-p6) zu erzeugen. Zur Generierung des subgenomischen (p6-Luc) HEV-Modells wurde ein Plasmidkonstrukt mit subgenomischem HEV verwendet. Dieses Plasmid enthält eine HEV-Sequenz, in der der 5′-Bereich des HEV-ORF2 durch das in-frame Luciferase-Reportergen von Gaussia princeps ersetzt wurde [ 16 ].
Huh7-, U87- und HEK293-Zellen wurden mit subgenomischer HEV-RNA elektroporiert, um subgenomische HEV-Modelle (Huh7-p6-Luc, U87-p6-Luc und HEK293-p6-Luc) zu erzeugen. Um unspezifische Effekte von 2CMC auf das Luciferase-Signal zu normalisieren, wurden Huh7-Zellen verwendet, die stabil eine nicht-sekretierte Firefly-Luciferase unter der Kontrolle des humanen Phosphoglyceratkinase (PGK)-Promotors exprimieren (PGK-Luc) [ 18 ]. Zusätzlich wurden Huh7-Zellen, die einen subgenomischen HCV-bizistronischen Replikon (I389/NS3-3 V/LucUbiNeo-ET) (Huh7-HCV-Luc) tragen, als positive Kontrolle für die antivirale Aktivität verwendet.
Quantifizierung der HEV-Replikation
Die Aktivität der sezernierten Gaussia -Luciferase im Zellkulturmedium wurde mit dem BioLux® Gaussia Luciferase Flex Assay Kit (New England Biolabs) gemessen . Die Quantifizierung der Gaussia -Luciferase-Aktivität erfolgte mit einem LumiStar Optima Lumineszenzzähler (BMG LabTech, Offenburg, Deutschland). Für die vollständigen infektiösen Modelle (HEV-p6) wurde die intrazelluläre virale RNA quantifiziert. Die RNA-Isolierung erfolgte mit dem Machery-Nucleo Spin RNA II Kit (Bioke, Leiden, Niederlande), die Quantifizierung mit einem NanoDrop ND-1000 Spektralphotometer (Wilmington, DE, USA).2-CMC-Kristalle für Forschungszwecke in Kiel, Deutschland; 2-CMC-Kristalle für Forschungszwecke in Aachen, Deutschland; 2-CMC-Kristalle für Forschungszwecke in Freiburg, Deutschland; 2-CMC-Kristalle für Forschungszwecke (Laborlösungen) in Lübeck, Deutschland
cDNA wurde aus der Gesamt-RNA mit dem cDNA-Synthese-Kit (Takara Bio Inc., USA) hergestellt. Die HEV-RNA-Konzentration wurde mittels SYBR Green-basierter Echtzeit-PCR (Applied Biosystems® SYBR® Green PCR Master Mix, Life Technologies, CA, USA) gemäß den Herstellerangaben quantifiziert. Die PCR-Schritte umfassten eine 10-minütige Haltephase (95 °C), gefolgt von 40 Zyklen mit jeweils 15 s bei 95 °C, 30 s bei 58 °C und 30 s bei 72 °C. Glycerinaldehyd-3-phosphat-Dehydrogenase (GAPDH) diente als Referenzgen zur Normalisierung der Genexpression. Die relative Genexpression wurde anhand der Formel 2 <sup>-ΔΔCT</sup> (ΔΔCT = ΔCT<sub> Probe</sub> − ΔCT<sub> Kontrolle</sub> ) auf GAPDH normalisiert. Die HEV-Primersequenzen lauteten wie folgt: HEV-F, 5′-ATTGGCCAGAAGTTGGTTTTCAC-3′; HEV-R, 5′-CCGTGGCTATAATTGTGGTCT-3′; GAPDH-F, 5′-TGTCCCCACCCCCAATGTATC-3′. GAPDH-R, 5’CTCCGATGCCTGCTTCACTACCTT-3′.
MTT-Test
Die Zellen wurden in einer 96-Well-Platte ausgesät und mit 10 mM 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromid (MTT) (Sigma) versetzt. Anschließend wurden die Zellen 3 h bei 37 °C und 5 % CO₂ inkubiert . Danach wurde das Kulturmedium entfernt und 100 μl DMSO in jedes Well gegeben. Die Absorption jedes Wells wurde mit einem Mikroplatten-Absorptionsmessgerät (Bio-Rad, Japan) bei einer Wellenlänge von 490 nm gemessen.Die beste 2-CMC-Kristalle Forschungschemikalie online
Langzeitbehandlungsstudie
Für die Langzeitbehandlung des subgenomischen Modells (Huh7-p6-luc) wurden die Zellen in einer 96-Well-Platte mit 5000 Zellen pro Well ausgesät. Die Zellen der Kontrollgruppe (CTR) und der 2CMC-Behandlungsgruppe wurden alle 3 Tage (d) passagiert und mit der gleichen Zellzahl neu ausgesät. Zellen, die mit Vehikel (unbehandelt) oder 2CMC (10 µM) inkubiert wurden, blieben während der gesamten Inkubationszeit erhalten. Für die Langzeitbehandlung des infektiösen Modells (Huh7-p6) wurden die Zellen in einer 48-Well-Platte mit 2 × 10⁴ Zellen pro Well ausgesät. Die Zellen der Kontrollgruppe (CTR) und der 2CMC-Behandlungsgruppe wurden alle 3 Tage passagiert und mit der gleichen Zellzahl neu ausgesät. Zellen, die mit Vehikel (unbehandelt) oder 2CMC (10 µM) inkubiert wurden, blieben während der gesamten Inkubationszeit erhalten.
Western-Blot-Analyse
Kultivierte Zellen wurden in Laemmli-Probenpuffer mit 0,1 M DTT lysiert und 5 min bei 95 °C erhitzt. Anschließend wurden sie auf ein 10%iges Natriumdodecylsulfat-Polyacrylamidgel aufgetragen und 90 min bei 120 V elektrophoretisch getrennt. Die Proteine wurden danach 1,5 h bei 250 mA elektrophoretisch auf eine Polyvinylidendifluorid-Membran (Invitrogen) transferiert. Die Membran wurde anschließend mit einer Mischung aus 2,5 ml Blockierungspuffer (Odyssey, USA) und 2,5 ml phosphatgepufferter Salzlösung mit 0,05 % Tween 20 blockiert. Darauf folgte eine Inkubation über Nacht mit primären Anti-HEV-Kapsidprotein-Antikörpern (1:1000) bei 4 °C. Die Membran wurde anschließend dreimal gewaschen und danach 1 h mit einem Ziegen-Anti-Maus-IRDye-konjugierten Sekundärantikörper (Li-COR Biosciences, Lincoln, USA) (1:5000) inkubiert. Nach erneutem dreimaligem Waschen wurden die Proteinbanden mit einem Odyssey 3.0 Infrarot-Bildgebungssystem detektiert.
IC 50- und CC 50 -Berechnung
Der Wert der 50%igen Hemmkonzentration (IC 50 ) und der 50%igen zytotoxischen Konzentration (CC 50 ) wurden anhand des Modells Y¼Bottom þ (Top-Bottom)/ (1 þ 10^((LogIC50-X)*HillSlope)) unter Verwendung der Software GraphPad Prism 5 (GraphPad Prism 5; GraphPad Software Inc., La Jolla, CA, USA) berechnet. 2-CMC-Kristalle für Forschungszwecke in Kiel, Deutschland; 2-CMC-Kristalle für Forschungszwecke in Aachen, Deutschland; 2-CMC-Kristalle für Forschungszwecke in Freiburg, Deutschland; 2-CMC-Kristalle für Forschungszwecke (Laborlösungen) in Lübeck, Deutschland.Die beste 2-CMC-Kristalle Forschungschemikalie online
Statistische Analyse
Die statistische Analyse erfolgte mittels des ungepaarten, nichtparametrischen Mann-Whitney-Tests und einer einfaktoriellen ANOVA mit anschließendem Tukey-Test für Mehrfachvergleiche (GraphPad Prism Version 5.01; GraphPad Software). p -Werte unter 0,05 wurden als statistisch signifikant betrachtet. 2-CMC-Kristalle für Forschungszwecke (Laborlösungen) in Mainz, Deutschland; 2-CMC-Kristalle für Forschungszwecke (Laborlösungen) in Erfurt, Deutschland; 2-CMC-Kristalle für Forschungszwecke (Laborlösungen) in Rostock, Deutschland
Ergebnisse
In dieser Studie wurde die potenzielle anti-HEV-Wirkung von 2CMC in HEV-Replikationsmodellen mit Konzentrationen von 0,1 µM bis 10 µM untersucht. Wir konnten zeigen, dass 2CMC die HEV-induzierte Luciferaseaktivität signifikant reduzierte und die anti-HEV-Wirkung bei einer Konzentration von 10 µM mit der anti-HCV-Wirkung vergleichbar war (Abb. 1A ). Der IC <sub>50 </sub>-Wert von 2CMC gegen die HEV-Replikation betrug 1,64 µM, der CC <sub> 50 </sub>-Wert in Huh7-Zellen 111,2 µM und der Selektivitätsindex (SI, CC<sub>50</sub>/IC<sub>50</sub>) 67,8 (Abb. 1B ). Die anti-HEV-Wirkung von 2CMC wurde zudem im vollständigen (Kernow-C1, p6) Infektionsmodell des HEV-Genotyps 3 sowohl durch RT-PCR-Assay (Abb. 1 C) als auch durch Western-Blot-Assay (Abb. 1 D) bestätigt. Die beste 2-CMC-Kristalle Forschungschemikalie online
Abb. 1.
Die Daten stellen den Mittelwert ± SEM aus vier unabhängigen Experimenten dar. CTR, unbehandelte Kontrolle. (F) HEK293T-p6-luc- und U87-p6-luc-Zellen wurden 48 h lang mit den angegebenen Konzentrationen von 2CMC behandelt und anschließend einer Luciferase-Aktivitätsanalyse unterzogen. Die Daten stellen den Mittelwert ± Standardfehler des Mittelwerts (SEM) aus drei unabhängigen Experimenten dar. CTR, unbehandelte Kontrolle; *, p < 0,05. (G) Die angegebenen Zellen wurden 48 h lang mit 2CMC behandelt und anschließend mittels MTT-Assay auf ihre Zellviabilität untersucht. 2-CMC-Kristalle für Forschungszwecke (Laborlösungen) in Potsdam, Deutschland; 2-CMC-Kristalle für Forschungszwecke (Laborlösungen) in Berlin, Deutschland; Generische 2-CMC-Kristalle für Forschungszwecke (Laborlösungen) in München, Deutschland
Da extrahepatische Manifestationen im Zusammenhang mit HEV beschrieben wurden [ 12 ], weiteten wir unsere Studie auf weitere hepatische und extrahepatische Zelllinien aus. Infektions- und Replikationsmodelle für HEV wurden in HEK293-, PLC/PRF/5-, MRC5- und U87-Zellen etabliert. Das anti-HEV-Potenzial von 2CMC wurde in diesen Zelllinien getestet. Entsprechend den Ergebnissen in Huh7-basierten HEV-Replikations- und Infektionsmodellen beobachteten wir in allen Zellmodellen eine vergleichbare anti-HEV-Wirkung von 2CMC, ohne die Zellviabilität zu beeinträchtigen (Abb. 1 E bis G). Dosierungsanleitung für 2-CMC-Kristalle für Forschungszwecke (Laborlösungen) für Erwachsene in Hamburg, Deutschland; 2-CMC-Kristalle für Forschungszwecke (Laborlösungen) erhältlich in Frankfurt am Main, Deutschland.Die beste 2-CMC-Kristalle Forschungschemikalie online
Arzneimittelresistenz ist einer der Hauptfaktoren, die die Wirksamkeit antiviraler Therapien einschränken. Um 2CMC in dieser Hinsicht zu charakterisieren, führten wir Experimente durch, in denen HEV-Replikations- und Infektionsmodelle kontinuierlich 2CMC (10 μM) ausgesetzt wurden. Interessanterweise behielt 2CMC seine Anti-HEV-Aktivität in beiden Modellen auch nach Langzeitexposition bei (Abb. 2 A und B). Darüber hinaus wies die Negativkontrolle nach Langzeitinkubation mit 2CMC weiterhin hohe Luciferase-Aktivität auf, was einen Verlust der Zellviabilität während des Versuchszeitraums ausschließt (Abb. 2 C). Zusammenfassend lässt sich sagen, dass 2CMC eine hohe Barriere für die Entwicklung von Arzneimittelresistenzen darstellt. Die beste 2-CMC-Kristalle Forschungschemikalie online
Abb. 2.
Theoretisch können Nukleosid-/Nukleotidanaloga als potenzielle direkt wirkende Virostatika dienen, da sie an das aktive Zentrum der viralen RNA-Polymerase binden und so die Virusreplikation blockieren. Um die inhibitorische Spezifität von 2CMC gegenüber der HEV-Replikation zu untersuchen, führten wir einen Kompetitionstest mit Cytidintriphosphat (CTP) als Substrat und analogem Kompetitor von 2CMC durch. Unsere Ergebnisse zeigten, dass CTP die inhibitorische Wirkung von 2CMC auf die HEV-Replikationsaktivität dosisabhängig aufhob.
Guanosintriphosphat (GTP) hingegen zeigte keine Wirkung, was die inhibitorische Spezifität von 2CMC gegenüber der HEV-Replikation belegt (Abb. 3 A und B). Ein weiteres Nukleosidanalogon, Ribavirin, wird klinisch als Off-Label-Therapie bei HEV-Infektionen eingesetzt. Daher wurde seine anti-HEV-Wirkung in Kombination mit 2CMC getestet. Interessanterweise wurde ein mäßiger antagonistischer Effekt (-36,93 µM 2 %) beobachtet, was darauf schließen lässt, dass sie einen ähnlichen antiviralen Mechanismus anwenden (Abb. 4 A und B).
Abb. 3.
Abb. 4.
Diskussion
Eine Vielzahl von Nukleosidanaloga wird aufgrund ihrer starken antiviralen Wirkung und der geringen Resistenzentwicklung häufig zur Behandlung von Virusinfektionen eingesetzt. Ribavirin, ein Guanosin-Analogon, ist das Mittel der Wahl für die Behandlung der meisten Patienten mit chronischer HEV-Infektion. In einigen Fällen wurde jedoch ein Therapieversagen beobachtet. Sofosbuvir, ein Prodrug eines Uridin-Nukleosid-Analogons, das gegen HCV sehr wirksam ist, wurde kürzlich auf seine Wirksamkeit gegen HEV untersucht. Seine Wirksamkeit gegen HEV ist jedoch umstritten [ 9 , 17 ]. Empfohlene 2-CMC-Kristalle in Stuttgart, Deutschland; Nebenwirkungen und Vorsichtsmaßnahmen von 2-CMC-Kristallen in Düsseldorf, Deutschland; Empfehlungen zur Lagerung von 2-CMC-Kristallen in Leipzig, Deutschland; 2-CMC-Kristalle im Gesundheitswesen in Dortmund
2CMC, ein Cytidin-Nukleosid-Analogon, hemmt nachweislich die Infektion mit verschiedenen Viren, darunter HCV und HIV [ 5 ]. In dieser Studie konnten wir zeigen, dass 2CMC die HEV-Replikation in verschiedenen Zellmodellen stark hemmt, wenn auch mit geringfügigen Unterschieden (Abb. 1 A und C). Eine mögliche Erklärung dafür ist, dass diese Modelle die verschiedenen Schritte des HEV-Lebenszyklus nachbilden. Der vollständige infektiöse Klon (Huh7-p6) bildet den gesamten Zyklus der HEV-Infektion nach, während das subgenomische Modell (Huh7-p6-luc) aufgrund des Fehlens von ORF2 und ORF3 nur die Virusreplikation nachahmt.
Erfreulicherweise war die Anti-HEV-Aktivität bei bestimmten Konzentrationen mit der Anti-HCV-Wirkung vergleichbar. Noch wichtiger ist, dass 2CMC im Langzeitbehandlungsversuch eine hohe Resistenzbarriere aufwies. Wir konnten zeigen, dass es sich hierbei um einen spezifischen Anti-HEV-Effekt handelte und nicht um einen zytotoxischen Effekt. Es wird vermutet, dass 2CMC nach der Aufnahme in die Zellen in seine 5′-Triphosphat-Form (2CMC-CTP) umgewandelt wird, welches als aktives Molekül mit dem natürlichen Substrat CTP konkurriert. Unsere Ergebnisse bestätigen dies: CTP, nicht aber GTP, hebt die Anti-HEV-Wirkung von 2-CMC auf und offenbart somit einen möglichen Wirkmechanismus von 2CMC gegen HEV.
Da Ribavirin häufig zur Behandlung chronischer HEV-Patienten eingesetzt wird, lag eine Kombinationstherapie mit Ribavirin und 2CMC nahe. Um dies zu überprüfen, wurden die kombinatorischen Effekte beider Medikamente untersucht. Unerwarteterweise wurde ein antagonistischer Effekt beobachtet. Diese Ergebnisse stimmen mit früheren Beobachtungen zu den kombinatorischen Effekten von Ribavirin und 2-CMC auf HCV und HIV überein [ 3 ].
Es ist wichtig zu beachten, dass die potenziellen Nebenwirkungen von 2-CMC in zukünftigen Studien sorgfältig untersucht werden sollten. Die klinische Anwendung von Nukleosidanaloga war in einigen Fällen aufgrund von Off-Target-Effekten eingeschränkt. Die mitochondriale DNA-Polymerase ist ein wichtiges, unbeabsichtigtes Zielmolekül vieler Nukleosidanaloga. Es wurde berichtet, dass ein Nukleosidanalogon mit einer 2-C-Methylgruppe (2-CM) die mitochondriale Transkription und die oxidative Phosphorylierung reduzieren und dadurch den Zellstoffwechsel beeinträchtigen kann [ 1 , 10 ]. Daher wird empfohlen, dass sich zukünftige Entwicklungsbemühungen von Anti-HEV-Medikamenten auf die Entwicklung weniger toxischer Wirkstoffe auf Basis der chemischen Grundstruktur von 2CMC konzentrieren.
Zusammenfassend lässt sich sagen, dass 2CMC in etablierten Zellkulturmodellen eine starke Anti-HEV-Wirkung zeigt und als potenzielles Grundgerüst für die Entwicklung von Anti-HEV-Medikamenten dient. Um eine höhere Wirksamkeit und weniger Nebenwirkungen zu erzielen, ist weitere Forschung zur Optimierung des Wirkstoffs auf Basis der chemischen Struktur von 2CMC erforderlich.
Danksagungen
Einhaltung ethischer Standards
Dieser Artikel enthält keine Studien mit menschlichen oder tierischen Teilnehmern, die von den Autoren durchgeführt wurden, und entspricht den ethischen Standards für Forschung.
Interessenkonflikt
Die Autoren erklären, dass kein Interessenkonflikt besteht.
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